ዳግም የተዋሃዱ ፕሮቲን የማጥራት ስልቶች

የድጋሚ ፕሮቲን ማጥራት የባዮኬሚስትሪ ወሳኝ ገጽታ ነው፣ ​​ይህም ፕሮቲኖችን በምርምር፣ በህክምና እና በኢንዱስትሪ ውስጥ ለተለያዩ አፕሊኬሽኖች መነጠል እና ማጽዳት ያስችላል። ይህ የርእስ ክላስተር ከባዮኬሚስትሪ ጋር ባላቸው ተኳሃኝነት ላይ በማተኮር እንደገና የተዋሃዱ ፕሮቲኖችን ለማጥራት የሚያገለግሉ የተለያዩ የመንጻት ስልቶችን እና ዘዴዎችን ይዳስሳል።

የ Recombinant ፕሮቲን ማጥራት መግቢያ

ዳግም የተዋሃዱ ፕሮቲኖች እንደ ባክቴሪያ፣ እርሾ ወይም አጥቢ ህዋሶች ባሉ አስተናጋጅ ፍጥረታት ውስጥ የዲኤንኤ ቅደም ተከተሎችን በመግለጽ የሚፈጠሩ ሰው ሠራሽ ፕሮቲኖች ናቸው። እነዚህን ፕሮቲኖች ከተወሳሰቡ የሴሉላር ክፍሎች ማፅዳት ለታችኛው ተፋሰስ አፕሊኬሽኖች ንጹህ እና ንቁ ፕሮቲኖችን ለማግኘት አስፈላጊ ነው።

የመንጻት ስልቶች

እንደገና የተዋሃዱ ፕሮቲኖችን ለመለየት እና ለማጣራት የሚያገለግሉ በርካታ የመንጻት ስልቶች አሉ፡

• ክሮማቶግራፊ
• ሴንትሪፍግሽን
• ዝናብ
• Ultrafiltration
• የበሽታ መከላከያ ማጽዳት
• ሃይድሮፎቢክ መስተጋብር ክሮማቶግራፊ (ኤችአይሲ)
• ion ልውውጥ ክሮማቶግራፊ (IEX)
• ተያያዥነት ክሮማቶግራፊ
• የመጠን ማግለል ክሮማቶግራፊ (SEC)

ክሮማቶግራፊ

ክሮሞግራፊ ለፕሮቲን ንፅህና በጣም በስፋት ጥቅም ላይ ከሚውሉት ቴክኒኮች አንዱ ነው። እንደ ክሮማቶግራፊ አምድ ላለ የማይንቀሳቀስ ደረጃ ያላቸውን ዝምድና መሰረት በማድረግ ፕሮቲኖችን መለየትን ያካትታል።

ሴንትሪፍግሽን

ሴንትሪፉግሽን በመጠን እና በመጠን ልዩነት ላይ በመመስረት ክፍሎችን ለመለየት የሚያገለግል ዘዴ ነው። በተለምዶ የሕዋስ ፍርስራሾችን እና ፕሮቲኖችን ከታለመለት ፕሮቲን ለማስወገድ ይጠቅማል።

ዝናብ

የዝናብ መጠን ከሌሎች ሴሉላር ክፍሎች እንዲለይ በመፍቀድ የታለመውን ፕሮቲን በምርጫ ለማመንጨት ሬጀንቶችን መጠቀምን ያካትታል።

Ultrafiltration

Ultrafiltration የፕሮቲን ናሙናዎችን የማሰባሰብ እና የማጽዳት ዘዴ ነው። ፕሮቲኖችን በመጠን እና በመሙላት ላይ በመመርኮዝ ለመለየት ሴሚፐርሜብል ሽፋን ይጠቀማል.

የበሽታ መከላከያ ማጽዳት

Immunoaffinity purification የሚፈለገውን ፕሮቲን በምርጫ ለመያዝ እና ለመለየት ለታለመው ፕሮቲን የተወሰኑ ፀረ እንግዳ አካላትን ይጠቀማል።

ሃይድሮፎቢክ መስተጋብር ክሮሞግራፊ (ኤችአይሲ)

HIC ፕሮቲኖችን በሃይድሮፎቢክነት ላይ በመመስረት ይለያል ፣ ይህም የሃይድሮፎቢክ ፕሮቲኖችን ለመምረጥ ያስችላል።

ion ልውውጥ ክሮሞግራፊ (IEX)

IEX ፕሮቲኖችን በክፍያቸው ይለያቸዋል፣ ይህም ፕሮቲኖችን በተለያዩ የተጣራ ክፍያዎች ለማጥራት ይጠቅማል።

አፊኒቲ ክሮሞግራፊ

አፊኒቲ ክሮማቶግራፊ በዒላማው ፕሮቲን እና በ chromatography ማትሪክስ ላይ የማይንቀሳቀስ ሊጋንድ ለምርጫ ማጥራት ልዩ መስተጋብርን ይጠቀማል።

ክሮሞግራፊ (SEC) መጠን ማግለል

SEC ፕሮቲኖችን በክብደታቸው እና በሞለኪውላዊ ክብደታቸው እና ቅርጻቸው ላይ በመመርኮዝ ፕሮቲኖችን በማንጻት እንደ መጠናቸው ይለያል።

በባዮኬሚስትሪ ውስጥ ያሉ መተግበሪያዎች

ዳግም የተዋሃዱ ፕሮቲን የማጥራት ስልቶች በባዮኬሚስትሪ ምርምር እና አተገባበር ውስጥ ወሳኝ ሚና ይጫወታሉ፣ እነዚህንም ጨምሮ፡-

• መዋቅራዊ ባዮሎጂ ጥናቶች
• ኢንዛይም ኪኔቲክስ እና ሜካኒካል ጥናቶች
• የፋርማሲቲካል መድሃኒት እድገት
• ቴራፒዩቲክ ፕሮቲን ማምረት
• ባዮቴክኖሎጂ እና የኢንዱስትሪ መተግበሪያዎች

የማጥራት ፕሮቶኮሎችን ማመቻቸት

የፕሮቲን ንጽህና ፕሮቶኮሎችን ማመቻቸት የተለያዩ ነገሮችን ማለትም የታለመው ፕሮቲን ፊዚኮኬሚካላዊ ባህሪያት፣ የመንፃት መጠን እና የሚፈለገውን ንፅህና እና ምርትን ግምት ውስጥ ማስገባትን ያካትታል። የመንጻት ስልቶችን ለተወሰኑ የፕሮቲን ባህሪያት በማበጀት ተመራማሪዎች የማጥራት ሂደቱን ለከፍተኛ ውጤታማነት ማመቻቸት ይችላሉ።

ማጠቃለያ

የድጋሚ ፕሮቲን የመንጻት ስልቶች ለባዮኬሚስትሪ ምርምር እና አፕሊኬሽኖች ወሳኝ ናቸው፣ ይህም ፕሮቲኖችን ለተለያዩ አገልግሎቶች መነጠል እና ማጽዳት ያስችላል። የተለያዩ የመንጻት ቴክኒኮችን መርሆች እና አተገባበር መረዳት ባዮኬሚስቶች እና ፕሮቲን ሳይንቲስቶች ምርምራቸውን እንዲያሳድጉ እና እንደ ህክምና፣ ባዮቴክኖሎጂ እና መዋቅራዊ ባዮሎጂ ባሉ ዘርፎች ላይ አስተዋፅዖ እንዲያደርጉ አስፈላጊ ነው።