የማይንቀሳቀስ የብረት ትስስር ክሮማቶግራፊ (አይኤምኤሲ) ከባዮኬሚስትሪ ጋር በቅርበት የተሳሰረ በፕሮቲን ማጣሪያ ውስጥ አስፈላጊ ዘዴ ነው። IMAC ከክሮማቶግራፊ ማትሪክስ እና በሂስቲዲን የበለጸጉ ክልሎች በዒላማ ፕሮቲኖች ላይ በተቀናጁ የብረት ions መካከል ባለው ልዩ መስተጋብር ላይ ይንጠለጠላል። ይህ ዘዴ የመንጻት ሂደቶችን አሻሽሏል, ከፍተኛ የመምረጥ እና ቀላል የመለጠጥ ሁኔታዎችን ያቀርባል.
የ IMAC መርሆዎች
የ IMAC መርህ በዋነኝነት የተመሰረተው በማይንቀሳቀሱ የብረት ions እና በፕሮቲን ውስጥ ባሉ ሂስታዲን ቅሪቶች መካከል ባለው ልዩ ቅንጅት ላይ ነው።
የማይንቀሳቀስ ሜታል አፊኒቲ ክሮማቶግራፊ ቁልፍ እርምጃዎች፡-
- 1. ኮንዲሽንግ፡- ከማይንቀሳቀሱ የብረት ionዎች ጋር ያለው ክሮሞግራፊ ማትሪክስ ከተስማሚ ቋት ጋር እኩል ነው።
- 2. በመጫን ላይ ፡ ሂስቲዲን መለያ የተደረገበት ፕሮቲን የያዘው የፕሮቲን ናሙና በአምዱ ላይ ተጭኗል። የፍላጎት ፕሮቲን በማትሪክስ ላይ ከሚገኙት የብረት ions ጋር ይያያዛል, ሌሎች ብክለቶች ደግሞ ይታጠባሉ.
- 3. ማጠብ፡- ልዩ ያልሆኑ ያልተጣመሩ ቆሻሻዎች በማጠቢያ ቋት ይወገዳሉ፣ ይህም የታለመው ፕሮቲን ብቻ ከአምዱ ጋር የተያያዘ ነው።
- 4. ኢሉሽን ፡- ሂስቲዲን መለያ የተደረገበት ፕሮቲን ተመርጦ ይወጣል፣ ብዙ ጊዜ ቋት ከተፎካካሪ የብረት ion ወይም imidazole ጋር በመጠቀም የማይንቀሳቀሱ የብረት ions ጋር ያለውን መስተጋብር ይረብሸዋል።
ከፕሮቲን ማጽዳት ጋር ተኳሃኝነት
አይኤምኤክ በሂስ መለያ የተሰጡ ፕሮቲኖችን በመምረጥ ከፕሮቲን ማጥራት ጋር ተኳሃኝ ነው። ዘዴው ባክቴሪያ፣ እርሾ እና አጥቢ ህዋሶችን ጨምሮ በተለያዩ የስርዓተ-ፆታ ስርዓቶች ውስጥ የተገለጹትን ዳግም የተዋሃዱ ፕሮቲኖችን ለማጣራት ይጠቅማል። ይህ ክሮማቶግራፊ ቴክኒክ በተቀላጠፈ እና እንደገና ሊባዛ የሚችል የመንጻት ሂደትን በማስቻል በድጋሚ ፕሮቲን ቴክኖሎጂ መስክ በተለይ ዋጋ ያለው ሆኗል።
IMAC በባዮኬሚስትሪ
አይኤምኤክ በባዮኬሚስትሪ ውስጥ በተለይም ፕሮቲኖችን እና peptidesን በመለየት እና በማጥናት ረገድ ወሳኝ ሚና ይጫወታል። በከፍተኛ ልዩነቱ እና ገራገር ኤሉሽን ሁኔታዎች ምክንያት በተለያዩ ባዮሎጂያዊ ሂደቶች ውስጥ የተካተቱ ፕሮቲኖችን የማጥራት እና የመለየት ዋና መሳሪያ ሆኗል።
ማጠቃለያ
የማይንቀሳቀስ የብረታ ብረት ግንኙነት ክሮማቶግራፊ ከስር መርሆቹ ጋር በብረት-ሂስቲዲን መስተጋብር የመራጭ ትስስር መርሆዎች ለፕሮቲኖች ንፅህና ከፍተኛ አስተዋጽኦ ያበረክታሉ እና በባዮኬሚስትሪ መስክ ትልቅ ዋጋ አለው። የIMAC መርሆዎችን መረዳት እና ከፕሮቲን ንፅህና ጋር ያለው ተኳሃኝነት ለተመራማሪዎች እና ሳይንቲስቶች ባዮኬሚካል ሳይንስን ለማራመድ በሚያደርጉት ጥረት ወሳኝ ነው።